总皂苷(Saponin )含量试剂盒说明书
分光光度法 50管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
皂苷(Saponin)是苷元为三萜或螺旋甾烷类化合物的一类糖苷,主要分布于陆地高等植物中,也少量存在于海星和海参等海洋生物中。 许多中草药如人参、远志、桔梗、甘草、知母和柴胡等的主要有效成分都含有皂苷。有些皂苷还具有抗菌的活性或解热、镇静、抗癌等有价值的生物活性。
测定原理:
使用超声波提取样品中的皂苷,利用香草醛-高氯酸显色体系测定总皂苷含量。
组成:
产品名称
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AO028-50T/48S
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Storage
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提取液:液体
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50ml
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4℃
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试剂一:液体
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12ml
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4℃
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试剂二:高氯酸,自备
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试剂三:乙酸,自备
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说明书
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一份
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自备仪器和用品:
可见分光光度计、烘箱、水浴锅、移液器、1ml玻璃比色皿、高氯酸、乙酸、超声清洗器
总皂苷提取:
样本烘干,粉碎过筛,称取0.05g,加入1ml提取液,超声提取1h;8000g,25℃离心10min,取上清待测。
测定步骤
1、可见分光光度计预热30min以上,调节波长至589nm,蒸馏水调零。
2、测定管:取0.5ml上清,70℃挥发至干。加入0.2ml试剂一和0.8ml试剂二,55℃水浴20min。吸取200μl加入1ml玻璃比色皿中,再加入1000μl试剂三,充分混匀后,589nm下测定吸光度A1。
3、空白管:取0.5ml提取液,70℃挥发至干。加入0.2ml试剂一和0.8ml试剂二,55℃水浴20min。吸取200μl加入1ml玻璃比色皿中,再加入1000μl试剂三,充分混匀后,589nm下测定吸光度A2。计算△A= A1-A2。
总皂苷含量计算:
1.以齐墩果酸为对照品计算
标准状态下的回归曲线为:y = 0.0072x - 0.012,R2 = 0.9968,x为对照品浓度,μg/ml,y为吸光度△A。
总皂苷含量(μg/g干重)=(△A+0.012)÷ 0.0072×V样÷(V样÷V样总×W)
=138.89×(△A+0.012)÷W
2. 以人参皂苷Re为对照品计算
标准状态下的回归曲线为:y = 2.0466x - 0.0016,R2 = 0.9983,x为对照品浓度,mg/ml,y为吸光度△A。
总皂苷含量(μg/g干重)=(△A+0.0016)÷ 2.0466×V样÷(V样÷V样总×W)×1000
=488.62×(△A+0.0016)÷W
V样:加入样本体积,0.5ml;V样总:加入提取液体积,1ml;W:样本干重,g;1000,毫克到微克的换算系数。