肝素钠检测试剂盒(天青A比色法)
产品简介:
肝素钠是一种黏多糖,在多糖链上带有很多阴离子基团如磺酸基、羧基等,因此肝素具有强负电性,能与阳离子或带正电荷的分子结合,形成复合物。天青A是一种碱性燃料,其正电荷与肝素的阴离子结合,生成肝素-天青A复合物。即产生一种颜色反应,该反应程度与肝素的结合量具有一定比例关系,在505nm处检测吸光度,在碱性条件下,肝素浓度与吸光度值符合郎伯-比耳定律,通过检查标准曲线,获得肝素(钠)的效价。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:
产品名称
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KB009-100T
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Storage
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试剂(A):肝素标准(100U/ml)
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2×1ml
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-20℃避光
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试剂(B):Heparin检测液
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50ml
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4℃避光
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试剂(C):天青显色液
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50ml
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RT避光
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说明书
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一份
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储存条件:
-20℃,12个月有效。
操作步骤(仅供参考):
1、稀释标准品。
2、制作标准曲线:取干净离心管或试管,按下表进行操作,以0号管为空白对照,加入显色液后均应混匀,检测505nm处吸光度。可重复检测3次,测定结果求平均值,以效价为横坐标,吸光度为纵坐标作图得标准曲线。
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0
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1
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2
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3
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4
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5
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肝素标准(1U/ml)
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0
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0.4
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0.8
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1.2
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1.6
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2.0
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蒸馏水/ml
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2
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1.6
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1.2
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0.8
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0.4
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0
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检测液/ml
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0.5
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0.5
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0.5
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0.5
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0.5
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0.5
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天青显色液/ml
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0.5
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0.5
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0.5
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0.5
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0.5
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0.5
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3、肝素钠测定:准确称取一定量的待测肝素钠样品,用蒸馏水溶解成1mg/ml的溶液。检测之前,准确稀释成待测液。按下表进行操作,以蒸馏水为空白对照,加入显色液后均应混匀,检测505nm处吸光度。
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空白管
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标准管
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测定管
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肝素标准(1U/ml)
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-
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X
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-
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蒸馏水/ml
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2.0
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2.0-X
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-
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检测液/ml
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0.5
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0.5
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0.5
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天青显色液/ml
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0.5
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0.5
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0.5
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计算公式:肝素钠样品的效价(U/ml)=(P×V)/(m×Vi)
注意事项:
1、上述低温试剂避免反复冻融,以免失效或效率下降。
2、待测样本如不能及时测定,应置于2~8℃保存,3天内稳定。
3、如果样品浓度过高,应用蒸馏水稀释后重测,结果乘以稀释倍数
4、本产品仅供科研使用,严禁它用。