总淀粉检测试剂盒-分光法50T
简介
淀粉测定方法分为酸水解法和酶分析法。酸水解只能应用干纯淀粉样品。酶分析方法在前外理步骤淀粉凝胶化、液化和糊化糊精水解成葡萄糖,葡萄糖测定步骤等方面存在不同。AACC76-11法采用淀粉在高压蒸汽灭菌锅中及含水的条件下凝胶化,并用淀粉葡糖苷酶将淀粉转化为葡萄糖,再测定葡萄糖含量,采用AACC76-11法会导致许多样品和材料中包括高直链淀粉玉米淀粉和谷物制品淀粉含量检测结果偏低。近来,我们将检测方法进行了改进,使耐热a-淀粉酶和淀粉葡糖苷酶可以在相同的pH(pH5.0)下进行孵育,这样简化了测定步骤,并将麦芽酮糖生成的可能性降到最低。淀粉总量试剂盒可测定大部分食品、饲料、植物和谷物制品(天然或加工过的)对于大部分样品(如小麦粉)样品中的淀粉在孵育中(大约100℃并加入耐热a-淀粉酶)会完全溶解含有大量抗性淀粉的样品(如高直链玉米淀粉)需用1.7M NaOH或热DMSO进行预溶解。含有可溶性淀粉或麦芽糊精的样品,不需要用耐热-淀粉酶处理。
产品性能
特异性:可用于测定-葡聚糖(包括淀粉、糖原、植物糖原和非抗性麦芽糊精)
灵敏度:最小吸光度差异为0.010吸光度单位。这相当于当样品体积为100mL时,D-葡萄糖的浓度为1.0mg/L或淀粉浓度为0.9mg/L。
检测限:2.0mgD-葡萄糖(18mg淀粉)/L(在最大样品体积为100mL,吸光度差异为0.020时得到)。
检测范围:5-100ugD-葡萄糖,重复检测同一样品溶液其吸光度值会有0.005-0010吸光度单位的差异,这相当于样品体积为1.00mL时,样品溶液中D-葡萄糖浓度0.05-10mg/L。如果样品经过稀释,计算结果时需要乘以相应的稀释系数(F),如果在样品制备阶段,样品称量时,如10g/L,可能会产生0.02-0.05g/100g的差异。
检测原理
耐热a-淀粉酶将淀粉水解为可溶性有支链和无支链的麦芽糊精(1)
(a-淀粉酶,pH7.0或50-100℃)
(1)淀粉+H2O 麦芽糊精
如果需要(如含大量抗性淀粉的样品),可向样品中加入的2MKOH并搅拌,在4℃下使抗性淀粉预溶解,然后用醋酸钠缓冲液中和,再用-淀粉酶处理(2)。也可在100℃下,用的DMSO溶解。
(KOH再中和+a-淀粉酶)
(2) 抗性淀粉+H2O 麦芽糊精
淀粉葡糖苷酶(AMG)将麦芽糊精定量水解成D-葡萄糖
(AMG)
(3)麦芽糖精 D-葡萄糖
D-葡萄糖被氧化成D-葡萄酸盐,并释放一摩尔H2O2,再用过氧化物酶催化H2O2反应,产生的昆亚胺染料含量用比色法测定。
(葡萄糖氧化酶)
(4) D-葡萄糖+O2+ H2O D-葡萄糖酸盐+H2O2
(过氧化物酶)
(5)2H2O+对羟基苯甲酸+4-氨基安替比林 昆亚胺染料+4H2O
如果样品中含高水平的D-葡萄糖和麦芽糊精,可在测定前用含水乙醇(80%v/v)处理。一个样品可以在70分钟完成。2小时内可以完成20个样品检测。
保存条件:
未配制前在规定存储条件下6个月内有效,配制使用后在规定存储条件下3个月内有效。(各组分详细储存条件见瓶身)