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H2S含量测定试剂盒 (分光光度法50T/48S)
SG001
Hydrogen Sulfide Content Assay Kit (Spectrophotometry)
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SG001-50T/48S 50T/48S ¥620.00

 

H2S含量测定试剂盒说明书

                                                  分光光度法 50/48

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义:

H2S是一种新型气态信号分子,存在于脑内的神经递质,生理浓度的H2S对神经系统海马的长时程增强功能具有重要的调节作用,并对自发性高血压、出血性休克及肝硬化等疾病的过程发挥着重要的病理生理效应。

测定原理:

H2S与醋酸锌、N, N-二甲基对苯二胺和硫酸铁铵等反应生成亚甲基蓝,亚甲基蓝在665nm处有最大吸收峰,通过测定其吸光值可计算H2S含量。

组成:

产品名称

SG001-50T/48S

Storage

提取液:液体

50ml

4℃

试剂一:液体

50ml

4℃

试剂二:液体

32ml

4℃

试剂三:液体

16ml

4℃避光

试剂四:液体

16ml

4℃

试剂五:液体

2.5ml

4℃避光

说明书

一份

试剂三:液体16ml×1瓶,4℃避光保存。

试剂五:液体2.5ml×1瓶,4℃避光保存。

自备仪器和用品:

天平、低温离心机、可见分光光度计、1 ml玻璃比色皿、蒸馏水。

样品处理:

1. 组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~10001的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000g4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

3. 血清(浆):直接测定

操作表(取2 ml离心管,按照下表操作):

 

空白管

测定管

样品μl

 

600

H2Oμl

600

 

试剂一μl

600

600

充分震荡混匀

试剂二μl

600

600

10000g4℃,离心10min,去上清,留沉淀

H2Oμl

600

600

10000g4℃,离心10min,去上清,留沉淀

试剂一μl

300

300

试剂三μl

300

300

充分震荡混匀

试剂四μl

300

300

10000g4℃,离心10min,取800μl上清加入1ml玻璃比色皿

试剂五μl

40

40

混匀,25℃静置5min,测定665nm吸光值,记为A测定和A空白,ΔA=A测定-A空白。

H2S计算公式:

标准曲线回归方程为:y = 0.0044xR2 = 0.9988

1)组织样品

a.按照蛋白浓度计算

H2Snmol/mg prot=彩色印刷图库×V反总÷V×Cpr=340.9×ΔA÷Cpr

b.按照样本重量计算

H2Snmol/g鲜重)=彩色印刷图库×V反总÷V÷V样总×W= 340.9×ΔA÷W

2)液体样品

H2Snmol/ml=彩色印刷图库×V反总÷V= 340.9×ΔA

(3) 细胞

H2Snmol/104 cell=彩色印刷图库×V反总÷V÷V样总×细胞数量(万个)=340.9×ΔA÷细胞数量(万个)

V反总:反应总体积,0.9mlV样:反应中样品体积,0.6mlV样总:加入提取液体积,1mlW:样品质量,gCpr:蛋白浓度,mg/ml

注意事项:

最低检出限为1nmol/ml

象形图
警示语
Class
警告声明
UNub
危险声明
Packing Group
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