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H2S含量测定试剂盒 (微量法100T/96S)
SG002
Hydrogen Sulfide Content Assay Kit (Microassay)
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SG002-100T/96S 100T/96S ¥1200.00

 

H2S含量测定试剂盒说明书

                                                 微量法 100T/96S

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义:

H2S是一种新型气态信号分子,存在于脑内的神经递质,生理浓度的H2S对神经系统海马的长时程增强功能具有重要的调节作用,并对自发性高血压、出血性休克及肝硬化等疾病的过程发挥着重要的病理生理效应。

测定原理:

H2S与醋酸锌、N, N-二甲基对苯二胺和硫酸铁铵等反应生成亚甲基蓝,亚甲基蓝在665nm处有最大吸收峰,通过测定其吸光值可计算H2S含量。

组成:

产品名称

SG002-100T/96S

Storage

提取液:液体

100ml

4℃

试剂一:液体

25ml

4℃

试剂二:液体

16ml

4℃

试剂三:液体

8ml

4℃避光

试剂四:液体

8ml

4℃

试剂五:液体

1.5ml

4℃避光

说明书

一份

自备仪器和用品:

天平、低温离心机、酶标仪、96孔板、蒸馏水。

 样品处理:

1. 组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~10001的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000g4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

3. 血清(浆):直接测定。

操作表:

1、 酶标仪预热30min,调节波长至665nm

2、 操作表

 

空白管

测定管

样品(μl

 

150

H2Oμl

150

 

试剂一(μl

150

150

充分震荡混匀

试剂二(μl

150

150

10000g4℃,离心10min,去上清,留沉淀

H2Oμl

150

150

10000g4℃,离心10min,去上清,留沉淀

试剂一(μl

75

75

试剂三(μl

75

75

充分震荡混匀

试剂四(μl

75

75

10000rpm4℃,离心10min,吸取200μl上清96孔板中

试剂五(μl

10

10

混匀,25℃静置5min,测定665nm吸光值,记为A测定和A空白,ΔA=A测定-A空白。

H2S含量计算公式:

96孔板测定的计算公式如下

标准曲线回归方程为:y = 0.0022xR2 = 0.9988

1)组织样品

a.按照蛋白浓度计算

H2Snmol/mg prot=彩色印刷图库×V反总÷(V×Cpr)=681.8×ΔA÷Cpr

b.按照样本重量计算

H2Snmol/g 鲜重)=彩色印刷图库×V反总÷(V÷V样总×W)= 681.8×ΔA÷W

(3) 细胞

H2Snmol/104 cell=彩色印刷图库×V反总÷V÷V样总×细胞数量(万个)=681.8×ΔA÷细胞数量(万个)

2)液体样品H2Snmol/ml=彩色印刷图库×V反总÷V= 681.8×ΔA

V反总:反应总体积,0.225mlV样:反应中样品体积,0.15mlV样总:加入提取液体积,1mlW:样品质量,gCpr:蛋白浓度,mg/ml

注意事项:最低检出限为1nmol/ml

象形图
警示语
Class
警告声明
UNub
危险声明
Packing Group
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