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维生素E(VE)检测试剂盒(分光光度法50T/24S)
VS005
Vitamin E (VE) Content Assay Kit (Spectrophotometry)
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VS005-50T/24S 50T/24S ¥380.00

维生素EVitamin EVE)试剂盒说明书

                                                  分光光度法 50/24

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义:

维生素EVitamin E)是一种脂溶性维生素,其水解产物为生育酚,是生物体中最主要的抗氧化剂之一,能阻止不饱和脂肪酸收到过氧化作用的损伤,维持不饱和脂肪酸细胞膜的完整性和正常功能,具有延缓衰老、预防溶血性贫血作用,在医药、化妆品、保健品、食品行业具有较高的应用价值。

测定原理:

VE还原Fe3+Fe2+Fe2+1,10-菲罗啉产生有色络合物,在530nm有特征吸收峰。

组成:

产品名称

VS005-50T/24S

Storage

提取液:液体

100ml

4℃

试剂一:液体

5ml

    4℃避光

试剂二:液体

5ml

4℃

试剂三:液体

5ml

4℃

试剂四:液体

15ml

4℃

说明书

一份

 

试剂三:粉剂×1 瓶,-20 保存,用时加入 4ml 蒸馏水,混匀,用不完的试剂 4保存一周;

试剂四:粉剂×1 瓶,4 保存,用时加入 4ml 蒸馏水,混匀,用不完的试剂 4保存一周;

自备仪器和用品:

天平、研钵、离心机、可见分光光度计、1 ml玻璃比色皿、漩涡震荡仪。

样本处理

1. 组织:按照质量(g):提取液体积(ml)15~10的比例(建议称取约0.2g,加入1ml提取液)加入提取液,充分匀浆后用提取液定至2ml,在漩涡混匀仪上震荡5min,于25℃5000g离心10min,取上层测定。

2. 细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~10001的比例(建议1000万细胞加入2ml提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);在漩涡混匀仪上震荡5min,于25℃5000g离心10min,取上层测定。

3. 血清:取0.1ml,加1.9ml提取液,漩涡仪混匀上震荡5min,于25℃5000g离心10min,取上层测定。                   

测定操作

 

对照管

测定管

样品(μl

500

500

试剂一(μl

100

100

试剂二(μl

 

100

试剂三(μl

100

 

充分混匀,25℃反应5min

试剂四(μl

300

300

充分混匀,于1ml玻璃比色皿,无水乙醇调零,测定530nm处吸光值,记为A对照管和A测定管,A=A测定管-A对照管。

计算公式

标准曲线:y = 0.22x + 0.0065R2 = 0.9978

1. 按照蛋白含量计算

VE含量(μg/mg prot=A -0.0065÷ 0.22×V反总÷V×Cpr

                    = 9.09×A -0.0065÷ Cpr

2. 按照样本质量计算

VE含量(μg/g=A -0.0065÷ 0.22×V反总÷V×W÷V样总)

                    = 18.18×A -0.0065÷ W

3. 按照细胞数量计算

VE含量(μg/104 cell=A -0.0065÷ 0.22×V反总÷V×细胞数量÷V样总)

                    = 18.18×A -0.0065÷ 细胞数量

4. 按照液体体积计算

VE含量(μg/ml=A -0.0065÷ 0.22×V反总÷V×20

                = 181.82×A -0.0065

V反总:反应总体积,1ml;:V样:加入样本体积,0.5mlV样总:加入提取液体积,2mlCpr:蛋白浓度,mg/mlW:样本质量,g

注意事项

1. 若反应体系产生沉淀,需要将样品进行适当的稀释,并在计算公式中乘以稀释倍数。

2. 最低检出限为1μg/g

 

 

 

象形图
警示语
Class
警告声明
UNub
危险声明
Packing Group
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