血清总铁结合力(Total Iron Binding Capacity,TIBC)试剂盒说明书
分光光度法 50管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
血清总铁结合能力指血清转铁蛋白可结合铁的能力,其含量高低与缺铁性贫血、急性肝炎等疾病的发生密切相关。
测定原理:
Fe2+与菲洛嗪反应形成紫红色化合物,在562nm处有特征吸收峰。碱性条件下,血清转铁蛋白可以与Fe3+结合,剩余未结合的Fe3+可以被还原成Fe2+,此时吸光度A1与未结合Fe3+数量正相关;酸化后,转铁蛋白结合的Fe3+释放,并且进一步被还原成Fe2+ ,此时吸光度A2与总Fe3+数量正相关。A2减A1与TIBC浓度呈正比。
组成:
产品名称
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IS001-50T/48S
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Storage
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试剂一:液体
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50ml
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4℃
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试剂二:液体
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5ml
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4℃避光
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试剂三:液体
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5ml
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4℃避光
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试剂四:液体
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15ml
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4℃
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说明书
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一份
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试剂三:液体5ml×1瓶,4℃避光保存。(临用前根据用量将A液和B液按1:1混合)
自备仪器和用品:
天平、可见分光光度计、1 ml玻璃比色皿、蒸馏水。
测定操作表:
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对照管
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测定管
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血清(μl)
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100
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试剂一(μl)
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800
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试剂二(μl)
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100
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100
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混匀,37℃,10min
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试剂三(μl)
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100
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100
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混匀,37℃,5min,对照管调零,1ml玻璃比色皿测定562nm处吸光值A1,测完后立即加入试剂四
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试剂四(μl)
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300
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300
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混匀,37℃,5min,1ml玻璃比色皿,对照管调零,测定562nm处吸光值A2。ΔA=A2-A1
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血清总铁结合力计算公式:
标准曲线:y=0.5478x+0.0281,R2=0.9981
总铁结合能力定义:37℃条件下,每升血清结合Fe3+的μmol 数。
总铁结合能力TIBC(μmol/L)= ×V反总÷V样= 23.731×(A-0.0281)
V反总:反应总体积,1.3ml;V样:反应中样本体积,0.1ml
注意事项:
1. 吸光值大于0.8,样品适当稀释再测定,注意计算公式里乘以稀释倍数。
2. 试剂二、试剂三有一定的毒性,操作时请做好防护措施。
3. 检测限为4.78μmol/L。