血清铁浓度检测试剂盒说明书
微量法 100T/96S
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
血清铁是指血液中转铁蛋白所结合的铁，该指标常用于鉴别缺铁性与非缺铁性贫血。
测定原理：
亚硫酸钠还原血清Fe3+生成成Fe2+，Fe2+进一步与2, 2’- 联吡啶显色，在520nm处有吸收峰，测定该波长光吸收值即可计算血清铁含量。
组成：
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产品名称
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IS008-100T/96S
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Storage
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试剂一：粉剂
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1瓶
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4℃
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试剂二：粉剂
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1瓶
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4℃
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标准液：液体
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1ml
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4℃
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说明书
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一份
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试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前配制，加入15 ml蒸馏水充分溶解。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前配制，加入469μl冰醋酸，加入15 ml蒸馏水充分溶解。
标准液：液体1ml×1支（EP管），100 μmol/L Fe3+标准液，4℃保存。
自备仪器和用品：
离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、冰醋酸、氯仿和蒸馏水。
测定：
1. 分光光度计/酶标仪预热30 min，调节波长到520 nm，蒸馏水调零。
2. 标准液解冻：提前取出标准液，置于室温下充分解冻后混匀。
3. 空白管：取EP管，依次加入125 μl蒸馏水，125 μl试剂一，125 μl试剂二，混匀后盖紧，置于沸水浴5min，自来水冷却。加入62 μl氯仿（自备），充分震荡混匀；室温10000rpm，离心10min，小心吸取上层液210 μl，加入微量石英比色皿/96孔板，于520 nm测定吸光度，记为A空白管。
4. 标准管：取EP管，依次加入125 μl标准液，125 μl试剂一，125 μl试剂二，混匀后盖紧，置于沸水浴5min，自来水冷却。加入62 μl氯仿，充分震荡混匀；室温10000rpm，离心10min，小心吸取上层液210 μl，加入微量石英比色皿/96孔板，于520 nm测定吸光度，记为A标准管。
5. 测定管：取EP管，依次加入125 μl血清，125 μl试剂一，125 μl试剂二，混匀后盖紧，置于沸水浴5min，自来水冷却。加入62 μl氯仿，充分震荡混匀；室温10000rpm，离心10min，小心吸取上层液210 μl，加入微量石英比色皿/96孔板，于520 nm测定吸光度，记为A测定管。
注意：空白管和标准管只需测定一次。
血清铁浓度计算公式：
血清铁含量(μmol /dL)=[C标准液×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]×V总
=10 × (A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)
C标准液：100 μmol/L Fe3+标准液；V总：标准液总体积1ml；1 dL=0.1 L。
注意事项：
1、血清铁含量少，所用器皿（EP管）需要注意，避免被铁污染。
2、试剂一和试剂二溶液不稳定，需现配现用，新配制的试剂只能当天使用。
3. 最低检出限为1μmol/L。
