血清总铁结合力(Total Iron Binding Capacity，TIBC)试剂盒说明书
微量法100T/96S
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
血清总铁结合能力指血清转铁蛋白可结合铁的能力，其含量高低与缺铁性贫血、急性肝炎等疾病的发生密切相关。
测定原理：
Fe2+与菲洛嗪反应形成紫红色化合物，在562nm处有特征吸收峰。碱性条件下，血清转铁蛋白可以与Fe3+结合，剩余未结合的Fe3+可以被还原成Fe2+，此时吸光度A1与未结合Fe3+数量正相关；酸化后，转铁蛋白结合的Fe3+释放，并且进一步被还原成Fe2+ ，此时吸光度A2与总Fe3+数量正相关。A2减A1与TIBC浓度呈正比。
组成：
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产品名称
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IS002-100T/96S
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Storage
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试剂一：液体
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30ml
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4℃
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试剂二：液体
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5ml
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4℃避光
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试剂三：液体
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5ml
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4℃避光
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试剂四：液体
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7ml
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4℃
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说明书
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一份
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试剂三：液体5ml×1瓶，4℃避光保存。（临用前根据用量将A液和B液按1:1混合）
自备仪器和用品：
天平、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。
测定操作表：
1、 分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至562nm。
2、操作表
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对照管
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测定管
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血清（μl）
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40
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试剂一（μl）
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320
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280
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试剂二（μl）
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40
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40
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混匀，37℃，10min
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试剂三（μl）
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40
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40
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混匀，37℃，5min，对照管调零，取200μl于微量石英比色皿/96孔板测定562nm处吸光值A1，测完后立即加入试剂四
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试剂四（μl）
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60
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60
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混匀，37℃，5min，对照管调零，取200μl于微量石英比色皿/96孔板测定562nm处吸光值A2。ΔA=A2-A1。
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血清总铁结合力计算公式：
总铁结合能力定义：37℃条件下，每升血清结合Fe3+的μmol 数。
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线：y=0.5478x+0.0281，R2=0.9981
总铁结合能力TIBC（μmol/L）=（ΔA-0.0281）÷0.5478×V反总÷V样= 20.99×（ΔA-0.0281）
b. 用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线：y=0.2739x+0.0281，R2=0.9981
总铁结合能力TIBC（μmol/L）=（ΔA-0.0281）÷0.2739×V反总÷V样= 41.98×（ΔA-0.0281）
V反总：反应总体积，0.46ml；V样：反应中样本体积，0.04ml
注意事项：
1. 吸光值大于0.8，样品适当稀释再测定，注意计算公式里乘以稀释倍数。
2. 试剂二、试剂三有一定的毒性，操作时请做好防护措施。
3. 检测限为4.78μmol/L。
