血锌浓度检测试剂盒说明书
分光光度法 50管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
锌是必需的微量元素之一,在胰岛素和卟啉代谢中也起重要作用。
测定原理:
在pH 8.5~9.5的溶液中,Zn2+与锌试剂生成蓝色配位化合物,在620nm有最大吸收峰。
组成:
产品名称
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IS017-50T/48S
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Storage
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试剂一:液体(甲醇自备)
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50ml
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4℃
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试剂二:液体
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25ml
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4℃
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试剂三:粉剂
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1瓶
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4℃
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标准液:液体
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1ml
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4℃
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说明书
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一份
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试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前1天配制,加入25 ml无水乙醇充分溶解,盖紧,过夜待用。4℃保存可稳定约1个月,如颜色变黄,则已失效。
标准液:液体1ml×1支,10 μ mol/L Zn2+标准液。4℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、离心机、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、蒸馏水和无水乙醇。
测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到620 nm,蒸馏水调零。
2. 标准液解冻:提前取出标准液,置于室温下充分解冻后混匀。
3. 空白管:取EP管,依次加入500 μl蒸馏水,1000 μl试剂一,混匀;室温,8000g,离心10min,小心吸取上清液500 μl,加入1ml玻璃比色皿,加入500μl试剂二,500μl试剂三,充分混匀后25℃静置10min,于620 nm测定吸光度,记为A空白管。
4. 标准管:取EP管,依次加入500 μl标准液,1000 μl试剂一,混匀;室温,8000g,离心10min,小心吸取上清液500 μl,加入1ml玻璃比色皿,加入500μl试剂二,500μl试剂三,充分混匀后25℃静置10min,于620 nm测定吸光度,记为A标准管。
5. 测定管:取EP管,依次加入500 μl血清,1000 μl试剂一,混匀;室温,8000g,离心10min,小心吸取上清液500 μl,加入1ml玻璃比色皿,加入500μl试剂二,500μl试剂三,充分混匀后25℃静置10min,于620 nm测定吸光度,记为A测定管。
注意:空白管和标准管只需测定一次。
血锌浓度计算公式:
血锌浓度(μ mol/ L)=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]
= 10×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)
C标准液:10 μ mol/L Zn2+;
注意事项:
1. 试剂三需提前一天配制,如变黄色则不能再使用。
2. 加入试剂三混匀后,要在30 min内完成测定。
3. 最低检出限为1μ mol/L。