血钾浓度检测试剂盒说明书
微量法 100T/96S
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
钾保持机体的正常渗透压及酸碱平衡,参与糖及蛋白代谢,保证神经肌肉的正常功能。血清钾高于5.5mmol/L时称高血钾,高血钾可使神经、肌肉应激性增高,使心肌应激性降低,导致心动过缓,血清钾超过10毫摩尔/升时,可发生心室纤颤,甚至心脏在舒张期停跳。血清钾低于3.5mmol/L时称低血钾,低血钾可引起肌无力甚至肌肉弛缓性麻痹,引起心肌应激性增高,出现心动过速、心律紊乱甚至在收缩期停跳。因此,血清钾是常用的生化测定指标。
测定原理:
血清中钾离子与四苯硼钠作用,形成不溶于水的四苯硼钾,产生的浊度在一定范围内与钾离子浓度成正比。通过测定其浊度来测定测定血清钾含量。
组成:
产品名称
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IS004-100T/96S
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Storage
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试剂一:液体
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1瓶
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4℃
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液体一:液体
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1管
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4℃
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试剂二:粉剂
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1管
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4℃
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试剂三:液体
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1瓶
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4℃
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标准液:液体
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1瓶
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4℃
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说明书
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一份
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试剂二:粉剂×1管,4℃保存。临用前配制,取液体一,全部加入到试剂二瓶中,混匀。
标准液:液体×1瓶,0.5 mmol/L钾标准液,4℃保存。
自备仪器和用品:
离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、和蒸馏水。
血钾浓度测定操作:
1. 分光光度计/酶标仪预热30 min以上,调节波长到520 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂三置于25℃水浴中预热30 min。
3. 血清预处理:取EP管,依次加入50μl血清,450μl试剂一,充分混匀后室温(25℃左右),8000rpm,离心10min,取上清液,待测。
4. 空白管:微量石英比色皿/96孔板,依次加入40μl蒸馏水,20μl试剂二,混匀后静置5 min,再加入140μl试剂三,混匀后于520 nm测定吸光度,记为A空白管。
5. 标准管:微量石英比色皿/96孔板,依次加入40μl标准液,20μl试剂二,混匀后静置5 min,再加入140μl试剂三,混匀后于520 nm测定吸光度,记为A标准管。
6. 测定管:微量石英比色皿/96孔板,依次加入40μl上清液,20μl试剂二,混匀后静置5 min,再加入140μl试剂三,混匀后于520 nm测定吸光度,记为A测定管。
注意:空白管和标准管只需测定一次。
血钾浓度计算公式:
血钾浓度(mmol/dL)=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×样品稀释倍数×V样总=0.5×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)
C标准液:0.5 mmol/L;样品稀释倍数:(50μl血清+450μl试剂一)÷50μl血清=10;V样总:样品总体积:1dL=0.1L。
注意事项:
1. 采血后宜尽早进行血清钾测定,时间过长会影响血清钾含量。
2. 最低检出限为0.1mmol/L。