血清铁浓度检测试剂盒说明书
分光光度法 50管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
血清铁是指血液中转铁蛋白所结合的铁,该指标常用于鉴别缺铁性与非缺铁性贫血。
测定原理:
亚硫酸钠还原血清Fe3+生成成Fe2+,Fe2+进一步与2, 2’- 联吡啶显色,在520nm处有吸收峰,测定该波长光吸收值即可计算血清铁含量。
组成:
产品名称
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IS007-50T/48S
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Storage
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试剂一:粉剂
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1瓶
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4℃
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试剂二:粉剂
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1瓶
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4℃
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标准液:液体
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1ml
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4℃
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说明书
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一份
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试剂一:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前配制,加入20 ml蒸馏水充分溶解。
试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前配制,加入625μl冰醋酸,加入20 ml蒸馏水充分溶解。
标准液:液体1ml×1支(EP管),10 μmol/L Fe3+标准液,4℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、离心机、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、冰醋酸、氯仿和蒸馏水。
测定:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到520 nm,蒸馏水调零。
2. 标准液解冻:提前取出标准液,置于室温下充分解冻后混匀。
3. 空白管:取EP管,依次加入400 μl蒸馏水,400 μl试剂一,400 μl试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入200 μl氯仿(自备),充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液700 μl,加入1ml玻璃比色皿,于520 nm测定吸光度,记为A空白管。
4. 标准管:取EP管,依次加入400 μl标准液,400 μl试剂一,400 μl试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入200 μl氯仿,充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液700 μl,加入1ml玻璃比色皿,于520 nm测定吸光度,记为A标准管。
5. 测定管:取EP管,依次加入400 μl血清,400 μl试剂一,400 μl试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入200 μl氯仿,充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液700 μl,加入1ml玻璃比色皿,于520 nm测定吸光度,记为A测定管。
注意:空白管和标准管只需测定一次。
血清铁浓度计算公式:
血清铁含量(μmol /dL)=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V总
= (A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)
C标准液:10 μmol/L Fe3+标准液;V总:标准液总体积1ml;1 dL=0.1 L。
注意事项:
1、血清铁含量少,所用器皿(EP管)需要注意,避免被铁污染。
2、试剂一和试剂二溶液不稳定,需现配现用,新配制的试剂当天使用完毕。
3. 最低检出限为1μmol/L。