血清高密度脂蛋白(High density lipoprotein cholesterol , HDL-C)试剂盒说明书
微量法 100管/96样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
高密度脂蛋白为血清蛋白之一,主要由肝脏合成,运载周围组织中的胆固醇,再转化为胆汁酸或直接通过胆汁从肠道排出,是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白,是冠心病的保护因子,俗称“血管清道夫”,对冠心病的临床诊断是一个重要的参考指标。
测定原理:
用沉淀剂分离血清中的高密度脂蛋白胆固醇,利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇和游离脂肪酸,从而把胆固醇酯转化为FC;进一步利用胆固醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-胆甾烯酮和H2O2;再利用过氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和酚,生成红色醌类化合物;在500nm有特征吸收峰。
组成:
产品名称
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FA038-100T/96S
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Storage
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试剂一:液体
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20ml
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4℃
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试剂二:液体
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15ml
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4℃
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试剂三:粉剂
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1瓶
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-20℃
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试剂四:液体
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10ml
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4℃
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标准品:液体
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1ml
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4℃
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说明书
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一份
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试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存。临用前加5ml试剂四充分溶解
自备仪器和用品:
离心机,恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。
样品处理:
取血后3小时内分离血清,将血清样品与试剂一按照1:1的比例充分混匀,25℃静置15min,2000g离心15min,上清置于冰上待测。
测定操作表:
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空白管
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标准管
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测定管
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蒸馏水(μl)
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4
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标准品(μl)
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4
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样本(μl)
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4
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试剂二(μl)
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150
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150
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150
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试剂三(μl)
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50
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50
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50
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混匀,37℃静置30min,于1ml玻璃比色皿,空白管调零,测定500nm处吸光值A。分别记为A标准管和A测定管
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计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
HDL-C含量(mmol/L)= A测定管÷A标准管×C标准管
=5×A测定管÷A标准管
C标准管:5mmol/L
b.用96孔板测定的计算公式如下
HDL-C含量(mmol/L)= A测定管÷A标准管×C标准管
=5×A测定管÷A标准管
C标准管:5mmol/L
注意事项:
1. 样本切勿反复冻融,最好在取血后12小时内完成测定。
2. 配置好的试剂三4℃保存可半个月。
3. 线性范围为0.15mmol/L-3.8mmol/L。