食品中亚硝酸盐含量测定试剂盒说明书
分光光度法 50管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
在食品中,亚硝酸盐可与肉品中的肌红素结合而更安定,在食品加工业中作为保色剂,以维持肉制品的良好外观,并防止肉毒梭状芽孢杆菌的产生,提高食用肉制品的安全,但是人体长期摄入亚硝酸盐过量的食品,可诱发消化系统癌变。
测定原理:
在酸性条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应生成重氮化合物,再与N-1-萘基乙二胺形成紫红色偶氮化合物,在540nm处有特征吸收峰。
组成:
产品名称
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NM013-50T/48S
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Storage
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提取液一:液体
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50 ml
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室温
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提取液二:液体
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50 ml
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室温
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提取液三:液体
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50 ml
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室温
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提取液四:粉剂
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100 mg
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室温
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试剂一:液体
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25ml
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4℃避光
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试剂二:液体
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25ml
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4℃避光
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说明书
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一份
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自备仪器和用品:
天平、研钵或匀浆器、水浴锅、分光光度计、1ml玻璃比色皿、蒸馏水。
样品处理:
称取样品约0.2g鲜重或0.05g干重,破碎,加入0.5 ml 提取液一,沸水浴15min,冷却至室温,加入0.5 ml提取液二,震荡摇匀,加0.5 ml 提取液三,用镊子加少量粉剂四(约1 mg),静置30min,25℃,8000g离心15 min,取上清液待测。
测定步骤和操作表:
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测定管
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空白管
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蒸馏水(µl)
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350
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样品(µl)
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350
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试剂一(µl)
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325
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325
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试剂二(µl)
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325
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325
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混匀,25℃静置15min,于微量石英比色皿/96孔板中检测540nm处吸光值A。
△A=A测定 - A空白
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注意:空白管只需测定一次。
亚硝酸盐含量计算:
标准曲线回归方程为:y=0.234x + 0.0002,R2= 0. 999 x为标准品亚硝酸钠浓度(μg/ml) y为吸光值A。
NO2-(μg/g)=(△A-0.0002)÷0.234×V样÷(V样÷V样总×W)×0.6668
=(△A-0.0002)÷0.234×1.5×0.6668÷W
=4.27×(△A-0.0002)÷W
V样总:加入提取液体积,1.5 ml; V样:反应中样品体积,0.35ml;W:样品质量,g。
注意事项:
1. 试剂盒2-8℃保存。
2. 试剂对人体有一定的危害,请穿实验服,戴手套操作。
3. 若检测出得OD值在标准曲线范围外,请将样品进行适当的浓缩或稀释(A540 <0.09浓缩,A540 > 1.5 适当稀释)。
4. 最低检出限为0.5μg/g。