18936629630 工作日:09:00 am -17:30 pm

— 为广大用户提供满意的服务 —

结合态淀粉合成酶GBSS检测试剂盒(微量法 100T/96S)
SA004
Granule-Bound (GBSS) Starch Synthase Activity Assay Kit (Microassay)
货号 规格 目录价 会员价 库存 数量 购买
SA004-100T/96S 100T/96S ¥6100.00

结合态淀粉合成酶(Granule-bound starch synthaseGBSS

试剂盒说明书

                                                   微量法 100/96

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义:

GBSSEC 2.4.1.21)以束缚态存在于淀粉体中,催化淀粉链的加长反应,主要负责直链淀粉的合成。

测定原理:

GBSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上,同时生成ADP;进一步通过反应体系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP+还原为NADPH,其中NADPH生成量与前一步反应生成的ADP数量呈正比,通过340nm下测定NADPH的增加量,可以计算GBSS活性。

组成:

产品名称

SA004-100T/96S

Storage

提取液:液体

100ml×2

4

试剂一:液体

40ml

4

试剂二:粉剂

1

4

试剂:粉剂

1

4

试剂四粉剂

1

4

试剂五:液体

1

-20

试剂六:粉剂

1

-20

说明书

1

 

SA004-100T/96S试剂二临用前加入14ml试剂一充分混匀备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;

SA004-100T/96S试剂三临用前加入8ml试剂一充分混匀备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;

SA004-100T/96S试剂四临用前加入10ml试剂一充分混匀备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;

SA004-100T/96S试剂五临用前加入0.5ml蒸馏水,充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;

SA004-100T/96S试剂六临用前加入0.5ml蒸馏水,充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;

 

自备仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰蒸馏水

粗酶液制备:

称取0.1~0.2g组织(建议称取约0.1g组织),加入1ml提取液,冰浴中匀浆。10000g 4℃离心10min,弃上清,在沉淀中加入1ml提取液充分混匀,置冰上待测。

测定步骤

1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。

2、在EP管中按顺序加入下列试剂

试剂名称μl

测定管

样本

75

试剂二

135

混匀,30℃保温20 min,置沸水浴中1 min(盖紧,防止水分散失),冰浴冷却

试剂三

75

混匀,30℃保温30 min,置沸水浴中1 min(盖紧,防止水分散失),冰浴冷却,10000g 4℃离心10min,取上清液(如果一次性测定样本较多,可将试剂四、五和六按比例配成混合液)

上清液

150

试剂四

100

试剂

5

试剂

5

混匀后立即340 nm波长下记录初始吸光度A12min后的吸光度A2,计算ΔA=A2-A1

注意:试剂二如有沉淀,加入之前要使之充分溶解混匀。

GBSS活性计算

a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

1、按样本蛋白浓度计算:

单位的定义:每mg组织蛋白每分钟催化产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。

GBSSnmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T×稀释倍数

 =529×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

2、按照样本鲜重计算

单位的定义:每g组织每分钟催化产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。

GBSS活性(nmol/min /g 鲜重=[ΔA×V反总÷ε×d×109W× V÷V样总)÷T×稀释倍数=529×ΔA÷W

V 反总:反应体系总体积,2.6×10-4 LεNADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cmd:比色皿光径,1cmV样:加入样本体积,0.075 mlV样总:加入提取液体积,1 mlT:反应时间,2 min;稀释倍数:1.9Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mlW:样本质量。

b.使用96孔板测定的计算公式如下:

1、按样本蛋白浓度计算:

单位的定义:每mg组织蛋白每分钟催化产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。

GBSSnmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T×稀释倍数

  =1059×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

2、按照样本鲜重计算

单位的定义:每g组织每分钟催化产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。

GBSS活性(nmol/min /g 鲜重=[ΔA×V反总÷ε×d×109W× V÷V样总)÷T×稀释倍数 =1059×ΔA÷W

V 反总:反应体系总体积,2.6×10-4 LεNADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cmd96孔板光径,0.5cmV样:加入样本体积,0.075 mlV样总:加入提取液体积,1 mlT:反应时间,2 min;稀释倍数:1.9Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mlW:样本质量。

 

 

象形图
警示语
Class
警告声明
UNub
危险声明
Packing Group
SA004 结合态淀粉合成酶试剂盒说明书_微量法).pdf 下载

相关产品

淀粉磷酸化酶检测试剂盒(微量法 100T/96S)
SA022 100T/96S
淀粉磷酸化酶检测试剂盒(分光光度法 50T/48S)
SA021 50T/48S
淀粉脱分支酶检测试剂盒(微量法 100T/48S)
SA020 100T/48S
淀粉脱分支酶检测试剂盒(分光光度法 50T/24S)
SA019 50T/24S
支链淀粉检测试剂盒(微量法 100T/96S)
SA018 100T/96S
支链淀粉含量检测试剂盒(分光光度50T/48S)
SA017 50T/48S
直链淀粉检测试剂盒(微量法 100T/96S)
SA016 100T/96S
直链淀粉含量检测试剂盒(分光光度50T/48S)
SA015 50T/48S
β-淀粉酶(β-AL)检测试剂盒 (微量法100T/48S)
SA012 100T/48S
β-淀粉酶(β--AL)检测试剂盒 (分光光度50T/24S)
SA011 50T/24S
α-淀粉酶(α-AL)检测试剂盒 (微量法100T/48S)
SA010 100T/48S
α-淀粉酶(α-AL)检测试剂盒 (分光光度50T/24S)
SA009 50T/24S
淀粉分支酶检测试剂盒(微量法 100T/48S)
SA008 100T/48S
淀粉分支酶检测试剂盒(分光光度 50T/24S)
SA007 50T/24S
可溶性淀粉合成酶SSS检测试剂盒(微量法 100T/96S)
SA006 100T/96S
可溶性淀粉合成酶SSS检测试剂盒(分光光度法 50T/48S)
SA005 50T/48S
结合态淀粉合成酶GBSS检测试剂盒(微量法 100T/96S)
SA004 100T/96S
结合态淀粉合成酶GBSS检测试剂盒(分光光度 50T/48S)
SA003 50T/48S
ADPG焦磷酸化酶检测试剂盒(微量法 100T/96S)
SA002 100T/96S
ADPG焦磷酸化酶检测试剂盒(分光光度 50T/48S)
SA001 50T/48S