土壤全铁试剂盒说明书
微量法100T/96S
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
铁元素是一种十分重要的植物营养元素,土壤中铁含量直接影响着植物吸收利用以及生长代谢。
测定原理:
在pH2-9范围内,盐酸羟胺将三价铁转化为二价铁,与邻菲罗琳反应生成橙红色配合物,在510nm有特征吸收峰。
组成:
产品名称
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SSQ083-100T/96S
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Storage
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提取剂:粉剂
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1瓶
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4℃
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提取液:液体
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100ml×4
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4℃
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试剂一:液体
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2ml
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4℃避光
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试剂二:液体
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6ml
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4℃
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试剂三:液体
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4ml
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4℃避光
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说明书
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一份
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自备仪器和用品:
天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。
样本处理:
新鲜土样风干,过100目筛,按照土壤质量(g):提取剂质量(g)为1:4的比例(建议称取约0.1g土样,加入0.4g提取剂)缓慢加入提取剂于坩埚中,边加边搅拌均匀,然后在马弗炉中550℃熔融10min,然后在920℃熔融30min,趁热取出坩埚,将熔融物转入烧杯,边搅拌边加4ml提取液,必要时加盖,从烧杯口加入,防止溶液溅出,溶解30min后,5000g ,25℃离心10min,取上清液待测。
测定操作表:
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空白管
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测定管
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样本(μl)
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20
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试剂一(μl)
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20
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20
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试剂二(μl)
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60
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60
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试剂三(μl)
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40
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40
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H2O(μl)
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80
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60
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充分混匀,25℃静置20min
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于微量石英比色皿/96孔板,蒸馏水调零,测定510nm处吸光值A,分别记为A空白管和A测定管,△A=A测定管-A空白管
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计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线:y = 0.1569x -0.0173,R2 = 0.9992
全铁含量(mg/kg)=(△A+0.0173)÷ 0.1569×V反总÷(W×V样÷V样总)
= 254.94×(△A+0.0173)÷W
V反总:反应总体积,0.2ml;V样:反应体系中加入样本体积,0.02ml;V样总:加入提取液体积,4ml,W:样本质量,g
b. 用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线:y = 0.0785x -0.0173,R2 = 0.9992
全铁含量(mg/kg)=(△A+0.0173)÷ 0.0785×V反总÷(W×V样÷V样总)
= 509.55×(△A+0.0173)÷W
V反总:反应总体积,0.2ml;V样:反应体系中加入样本体积,0.02ml;V样总:加入提取液体积,4ml,W:样本质量,g