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土壤植酸酶(phytase)检测试剂盒(微量法100T/48S)
SSQ101
Soil Phytase Activity Assay Kit (Microassay)
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SSQ101-100T/48S 100T/48S ¥1000.00

土壤植酸酶(phytase)试剂盒说明书                                                                                                                                                                                                

                                                  微量法100T/48S

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义:

植酸酶(phytase)是催化植酸及其盐类水解为肌醇与磷酸(盐)的一类酶的总称,属磷酸单酯水解酶,它能将食品和饲料中植酸及其盐转化为可供有机体利用的有效磷,降低粪便中的磷含量,减轻对环境的污染,改善营养成分的吸收和利用,因此具有极其广泛的研究和应用价值。

测定原理:

植酸酶在一定温度和pH值条件下,水解底物植酸钠生成无机磷与肌醇衍生物,无机磷在酸性环境中与钼酸铵显色剂反应生成蓝色复合物,在700nm处有特征吸收峰,根据700nm处吸光值变化可计算得植酸酶活性。

组成:

产品名称

SSQ101-100T/48S

Storage

缓冲液:液体

60ml

4℃

试剂一:粉剂

1

4℃避光

试剂二:液体

15ml

4℃

显色剂:粉剂

6

4℃避光

说明书

一份

 

试剂一:粉剂×1瓶,4℃避光保存,临用前加缓冲液30ml配制,现用现配;用不完的试剂4℃保存一个月。

显色剂:粉剂×6管,4℃避光保存,临用前根据用量每瓶加0.4ml双蒸水溶解,再加1.6ml试剂二混匀

自备仪器和用品:

天平、低温离心机、酶标仪、96孔板、恒温水浴锅,甲苯(不允许快递)

样本处理:

新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。

测定操作表:

 

对照管

测定管

样本g

0.03

0.03

甲苯

20

20

振荡混匀,室温放置15min

缓冲液µl

500

 

试剂一µl

 

500

混匀,37℃孵育24h10000g4℃离心5min,取上清

上清

100

100

显色剂µl

100

100

混匀,静置15min,测定700nm处吸光值,A=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。

酶活性计算公式:

标准曲线:y = 0.8795x + 0.0084R2 = 0.9977x为标准品浓度(μmol/ml),y为吸光值A

酶活性定义:37℃pH5.5的条件下,每克土样每小时从5mmol/L的植酸钠溶液中释放出1μmol的无机磷为一个酶活力单位。

植酸酶活性(μmol/h /g 土样)=A-0.0084÷0.8795×V反总÷W÷T

                             =0.82×A-0.0084

V反总:反应总体积,0.52mlT:反应时间,24hW:样本质量,0.03g

注意事项:

1、显色剂需要临用前根据用量配制,每一瓶是10个样本的用量,新配制的显色剂若有颜色则已经污染或者试剂过期,应放弃使用。

2ΔA线性范围为0.01-0.5

 

 

象形图
警示语
Class
警告声明
UNub
危险声明
Packing Group
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