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土壤中性木聚糖酶(S-NEX)测定试剂盒(微量法100T/48S)
SSQ099
Soil Neutral Xylanase (S-NEX) Activity Assay Kit (Microassay)
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SSQ099-100T/48S 100T/48S ¥780.00

土壤中性木聚糖酶(Soil Neutral XylanaseS-NEX)测定

试剂盒说明书

                                                   微量法100T/48S

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义:

木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生,能催化水解木聚糖,也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶,可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖,降低酿造中物料的粘度,促进有效物质的释放,以及降低饲料中的非淀粉多糖,促进营养物质的吸收利用,因而广泛的应用于酿造和饲料工业中,NEX一般分离自最适生长pH6-8的微生物。

测定原理:

NEX在中性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖,在沸水浴条件下进一步与3,5-二硝基水杨酸发生显色反应,在540nm处有特征吸收峰,反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比,通过测定反应液在540nm吸光值增加速率,可计算NEX活力。

组成:

产品名称

SSQ099-100T/48S

Storage

缓冲液:液体

10ml

4℃

试剂一:液体

3ml

4℃避光

试剂二:液体

10ml

4℃避光

说明书

一份

自备仪器和用品:

天平、常温离心机、震荡仪、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板

样品处理:

新鲜土样风干,过30-50目筛。

测定操作表:

1、 分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至540nm

2、 操作表

 

对照管

测定管

土样(g

0.02

0.02

缓冲液(μl

150

100

试剂一(μl

 

50

混匀,50℃震荡反应30min,立即90℃水浴10min8000g25℃离心10min,取上清100μl

试剂二(μl

100

100

混匀,90水浴中显色5min,取180μl于微量石英比色皿/96孔板测定540nm处吸光值A,分别记为A对照管、A测定管,A=A测定管-A对照管。

S-NEX计算公式:

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线:y = 1.6904x + 0.0058R2 = 0.9989

酶活定义:50℃pH6.0条件下,每克土壤每天分解木聚糖产生1μmol 还原糖所需的酶量为一个酶活单位。

S-NEX活力(μmol/d/g土样)=A-0.0058÷ 1.6904×V反总×103÷ W÷T÷ 150

                        = 28.4×A -0.0058÷ W

V反总:反应总体积,0.15mlT:反应时间,1/48d10001mmol/L =103μmol/L150:木糖分子量。

b.96孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y = 0.8452x + 0.0058R2 = 0.9989

酶活定义:50℃pH6.0条件下,每克土壤每天分解木聚糖产生1μmol 还原糖所需的酶量为一个酶活单位。

S-NEX活力(μmol/d/g土样)=A-0.0058÷ 0.8452×V反总×103÷ W÷T÷ 150

                        = 56.8×A540-0.0058÷ W

V反总:反应总体积,0.15mlT:反应时间,1/48d10001mmol/L =103μmol/L150:木糖分子量。

注意事项:

1. 保证震荡反应30min,使酶与底物充分接触。

2. 注意90℃水浴防止爆开,以免改变反应体系。

 

 

象形图
警示语
Class
警告声明
UNub
危险声明
Packing Group
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