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土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)检测试剂盒(微量法100T/48S)
SSQ103
Soil β-Xylosidase (S-β-XYS) Activity Assay Kit (Microassay)
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SSQ103-100T/48S 100T/48S ¥1800.00

土壤β-木糖苷酶(Solid-β- xylosidase, S-β-XYS)测定试剂盒说明书

                                                  微量法100T/48S

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义:

β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体,是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶,产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。另外,β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业,比传统的漂白法环保,具有广泛的应用价值。

测定原理:

S-β-XYS催化对硝基苯酚-β-D-木糖苷产生对硝基苯酚,对硝基苯酚在405nm处有特征吸收峰,测定405nm光吸收增加速率,可计算S-β-XYS活性。

组成:

产品名称

SSQ103-100T/48S

Storage

提取液:液体

100ml

4℃

试剂一:液体

1ml

4℃避光

试剂二:液体

10ml

4℃

试剂三:液体

10ml

4℃

说明书

一份

自备仪器和用品:

天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

粗酶液提取

0.1g鲜土或风干土样,加入1ml提取液进行冰浴匀浆,室温振荡提取30min,然后10000g4℃,离心10min,取上清待测。

测定操作表:

1、 分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至405nm

2、 操作表

 

对照管

测定管

样本(μl

40

40

试剂一(μl

 

10

试剂二(μl

80

70

混匀,45℃水浴20min

试剂三(μl

80

80

混匀,静置5min405nm处测定吸光值A计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。

β-木糖苷酶活性计算公式:

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线:y=13.226x+0.0011R2=0.9998x为标准品浓度(μmol/ml),y为吸光值ΔA

酶活定义:每克土样每天催化产生mol对硝基苯酚的酶量为一个酶活单位。

β-木糖苷酶活性(μmol/d /g 土样)=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反总÷(V÷V样总×W)÷T

=16.33×(ΔA-0.0011)÷W

V样总:加入提取液体积,1mlV反总:反应总体积,0.12mlV样:反应中样品体积,0.04mlW:样品质量,gT:反应时间,20min=1/72d

b.96孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y=6.613x+0.0011R2=0.9998x为标准品浓度(μmol/ml),y为吸光值ΔA

酶活定义:每克土样每天催化产生mol对硝基苯酚的酶量为一个酶活单位。

β-木糖苷酶活性(μmol/d /g 土样)=(ΔA-0.0011) ÷6.613×V反总÷(V÷V样总×W)÷T

=32.66×(ΔA-0.0011)÷W

V样总:加入提取液体积,1mlV反总:反应总体积,0.12mlV样:反应中样品体积,0.04mlW:样品质量,gT:反应时间,20min=1/72d

 

ΔA控制在0.01-1范围内,若ΔA大于1,可适当减小样本量。

标准曲线线性范围为:0.01μmol/ml-0.5μmol/ml

 

 

象形图
警示语
Class
警告声明
UNub
危险声明
Packing Group
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