土壤淀粉酶(Soil Amylase,S-AL)试剂盒说明书
分光光度法 50管/24样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
淀粉酶(EC3.2.1.1)是催化淀粉水解的一类酶的总称。土壤中的淀粉酶主要来自于微生物,是一种重要的酶制剂,广泛应用于粮食加工、食品、酿造、发酵、纺织品工业和医药行业。
测定原理:
淀粉酶水解淀粉产生还原糖,可与3,5-二硝基水杨酸反应生成红棕色物质,在508nm处有特征吸收峰,颜色深浅在一定范围内与还原糖量成正比。
组成:
产品名称
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SSQ088-50T/24S
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Storage
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试剂一:液体
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25ml
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4℃
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试剂二:液体
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8ml
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4℃
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试剂三:液体
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30ml
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4℃
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说明书
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一份
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试剂二:液体8ml×1瓶,4℃保存。若出现沉淀析出,需70℃加热溶解后再用。
自备仪器和用品:
天平、可见分光光度计、水浴锅、低温离心机、1ml玻璃比色皿、甲苯。
测定操作表:
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对照管
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测定管
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土样(g)
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0.1
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0.1
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甲苯(μl)
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30
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30
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25℃静置15min
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试剂一(μl)
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550
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250
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试剂二(μl)
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300
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充分混匀,37℃震荡1h,8000rpm,25℃,离心10min
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上清液(μl)
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500
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500
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试剂三(μl)
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500
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500
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充分混匀,90℃水浴5min,待冷却后,用蒸馏水调零,于1ml玻璃比色皿中测定508nm各管吸光值,分别记为A对照管和A测定管,△A=A测定管-A对照管。
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计算公式:
标准曲线:y = 0.2525x - 0.034,R² = 0.9917
酶活单位定义:每g土样每天催化生成1mg还原糖为一个酶活力单位。
S-AL(mg/d/g 鲜重)=(△A +0.034)÷0.2525×V反总÷W÷T
=52.32×(△A +0.034)÷W
V反总:反应体系总体积,0.55ml;T:反应时间,1/24d; W:样本质量,g。