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土壤酸性木聚糖酶(S-ACX)测定试剂盒(分光光度法50T/24S)
SSQ096
Soil Acidic Xylanase (S-ACX) Activity Assay Kit (Spectrophotometry)
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SSQ096-50T/24S 50T/24S ¥450.00

土壤酸性木聚糖酶(Soil Acidic XylanaseS-ACX)测定

试剂盒说明书

                                                  分光光度法 50/24

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义:

木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生,能催化水解木聚糖,也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶,可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖,降低酿造中物料的粘度,促进有效物质的释放,以及降低饲料中的非淀粉多糖,促进营养物质的吸收利用,因而广泛的应用于酿造和饲料工业中,ACX一般分离自耐酸的真菌,细菌及部分霉菌。

测定原理:

ACX在酸性环境下能将木聚糖降解成还原性寡糖和单糖,进一步在沸水浴条件下与3,5-二硝基水杨酸发生显色反应,在540nm处有特征吸收峰,反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比,通过测定反应液在540nm吸光值增加速率,可计算ACX活力。

组成:

产品名称

SSQ096-50T/24S

Storage

缓冲液:液体

20ml

4℃

试剂一:液体

5ml

4℃避光

试剂二:液体

25ml

4℃避光

说明书

一份

 

试剂三:粉剂×1 瓶,-20 保存,用时加入 4ml 蒸馏水,混匀,用不完的试剂 4保存一周;

试剂四:粉剂×1 瓶,4 保存,用时加入 4ml 蒸馏水,混匀,用不完的试剂 4保存一周;

自备仪器和用品:

天平、常温离心机、震荡仪、恒温水浴锅,可见分光光度计、1 ml玻璃比色皿。

样品处理:

新鲜土样风干,过30-50目筛。

测定操作表:

 

对照管

测定管

土样(g

0.1

0.1

缓冲液(μl

600

400

试剂一(μl

 

200

混匀,50℃震荡反应30min,立即90℃水浴10min8000g25℃离心10min,取上清500μl

试剂二(μl

500

500

混匀,90水浴中显色5min1ml玻璃比色皿,对照管调零,测定A540

S-ACX计算公式

标准曲线:y = 2.5554x - 0.002 R2 = 0.9983

酶活定义:50℃pH4.8条件下,每克土壤每天分解木聚糖产生1μmol 还原糖所需的酶量为一个酶活单位。

S-ACX活力(μmol/d/g 土样)=A540+0.002÷ 2.5554×V反总×103÷ W÷T÷ 150

                      = 75.14×A540+0.002÷ W

V反总:反应总体积,0.6mlT:反应时间,1/48d10001mmol/L =103μmol/L150:木糖分子量。

注意事项:

1. 保证震荡反应30min,使酶与底物充分接触。

2. 注意90℃水浴防止爆开,以免改变反应体系。

 

 

象形图
警示语
Class
警告声明
UNub
危险声明
Packing Group
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